Plasmide Double Nickase (h) PRDM1/Blimp-1: sc-400585-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PRDM1/Blimp-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PRDM1/Blimp-1 Double Nickase (h) et le plasmide PRDM1/Blimp-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PRDM1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PRDM1/Blimp-1 Antibody (C-7): sc-398699
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PRDM1/Blimp-1 | sc-400585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PRDM1/Blimp-1 | sc-400585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDM1 (également appelé Blimp-1) code un répresseur transcriptionnel contenant un domaine PR/SET, qui coordonne les programmes de différenciation terminale et impose une répression génique spécifique de lignée. Dans les cellules immunitaires, PRDM1 régule la maturation des plasmocytes, l’épuisement des lymphocytes T et les décisions de destin effecteur en remodelant la chromatine et en réprimant des cibles telles que MYC ainsi que des réseaux de gènes sensibles aux interférons, intégrant ainsi les signaux issus du BCR/TCR et des voies des cytokines. Au-delà de la biologie des lymphocytes, PRDM1 contribue à la différenciation épithéliale et aux réponses au stress, reflétant des rôles étendus dans le contrôle transcriptionnel et la stabilité des états cellulaires. Une activité ou une expression dérégulée de PRDM1 a été associée à des dysfonctionnements immunitaires et à de multiples cancers, ce qui en fait une cible fréquente d’études portant sur le blocage de la différenciation, les circuits transcriptionnels oncogéniques et les interactions tumeur–système immunitaire.
PRDM1/Blimp-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PRDM1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PRDM1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PRDM1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PRDM1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.