Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO PP2A-Cβ (m): sc-422382
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PP2A-Cβ Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PP2A-Cβ, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PP2A-Cα/β Antibody (1D6): sc-80665
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PP2A-Cβ (m) | sc-422382 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Ppp2cb code la sous-unité catalytique Cβ de la protéine phosphatase 2A (PP2A), une phosphatase majeure sérine/thréonine qui contrebalance la signalisation des kinases en déphosphorylant de nombreux substrats dans le cytoplasme et le noyau. Les holoenzymes contenant PP2A-Cβ régulent la progression du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l’ADN, l’apoptose et le contrôle métabolique via des voies incluant les signalisations PI3K–AKT, MAPK/ERK et Wnt/β-caténine. Dans les systèmes murins, la perturbation de l’activité de PP2A influence l’homéostasie de phosphorylation et peut remodeler des réseaux de signalisation fréquemment impliqués dans la transformation oncogénique et les dysfonctionnements neurobiologiques. Ppp2cb constitue donc un nœud utile pour disséquer le contrôle, dépendant des phosphatases, de la croissance, de l’adaptation au stress et de la signalisation neuronale.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PP2A-Cβ (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ppp2cb dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ppp2cb, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ppp2cb à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PP2A-Cβ.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ppp2cb pour l'étude de la signalisation de PP2A-Cβ, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ppp2cb essentiels à la fonction de PP2A-Cβ
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ppp2cb pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PP2A-Cβ plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le PP2A-Cβ plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ppp2cb. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PP2A-Cβ plasmide HDR (m) et le PP2A-Cβ (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ppp2cb pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ppp2cb définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.