Plasmide Double Nickase (h) plexin-B3: sc-405160-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) plexin-B3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide plexin-B3 Double Nickase (h) et le plasmide plexin-B3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PLXNB3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) plexin-B3 | sc-405160-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) plexin-B3 | sc-405160-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLXNB3 code la plexine‑B3, un récepteur transmembranaire de la famille des plexines qui relaie des signaux de guidage dépendants des sémaphorines et régule le remodelage du cytosquelette. La plexine‑B3 influence la migration cellulaire, l’adhérence et la croissance des neurites via des voies associées aux GTPases de la famille Rho et à des interactions croisées avec des récepteurs tyrosine kinases, organisant une signalisation directionnelle à la membrane plasmique. Dans les tissus humains, PLXNB3 a été étudié dans le cadre de processus neurodéveloppementaux et de programmes de motilité aberrants pertinents pour l’invasion tumorale et la biologie des métastases. Ces fonctions font de PLXNB3 un nœud utile pour étudier comment des signaux de guidage extracellulaires sont transduits en modifications de la dynamique de l’actine et du comportement cellulaire.
plexin-B3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PLXNB3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PLXNB3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PLXNB3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PLXNB3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.