Plasmide Double Nickase (h) PLD6: sc-410373-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PLD6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PLD6 Double Nickase (h) et le plasmide PLD6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PLD6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PLD6 | sc-410373-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **PLD6** code une endonucléase de la famille des phospholipases D localisée sur la membrane externe des mitochondries, également appelée **MitoPLD**, qui génère de l’acide phosphatidique à partir de la cardiolipine, reliant ainsi le métabolisme lipidique à la dynamique mitochondriale. L’activité de PLD6 contribue à la fusion mitochondriale et à l’architecture de l’organite, et elle participe aux voies de biogenèse des petits ARN dans les cellules germinales via des rôles dans le traitement des **piARN** et le silençage des transposons. En influençant le remodelage de la membrane mitochondriale et les mécanismes de défense du génome, PLD6 est pertinente pour des études sur l’intégrité de la lignée germinale, la méiose et les réponses au stress cellulaire. La dérégulation de ces processus a été associée à des phénotypes reproductifs et à des défauts cellulaires liés au dysfonctionnement mitochondrial, ce qui fait de PLD6 une cible d’intérêt pour des investigations mécanistiques.
PLD6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PLD6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PLD6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PLD6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PLD6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.