Plásmido Doble Nickase (h) PLD6: sc-410373-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PLD6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PLD6 (h) y el plásmido de doble nickasa PLD6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PLD6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PLD6 | sc-410373-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **PLD6** codifica una endonucleasa de la familia fosfolipasa D localizada en la membrana externa mitocondrial, también conocida como **MitoPLD**, que genera **ácido fosfatídico** a partir de **cardiolipina**, conectando el metabolismo lipídico con la dinámica mitocondrial. La actividad de PLD6 contribuye a la **fusión mitocondrial** y a la **arquitectura** de la mitocondria, y participa en vías de **biogénesis de ARN pequeños** en células germinales mediante funciones en el procesamiento de **piRNA** y el silenciamiento de **transposones**. Al influir en la remodelación de la membrana mitocondrial y en mecanismos de defensa del genoma, PLD6 es relevante para estudios sobre la integridad de la línea germinal, la meiosis y las respuestas celulares al estrés. La desregulación de estos procesos se ha asociado con fenotipos reproductivos y defectos celulares relacionados con la disfunción mitocondrial, lo que respalda a PLD6 como una diana para investigaciones mecanísticas.
PLD6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PLD6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PLD6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PLD6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PLD6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.