Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PIDD (h): sc-403439
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PIDD Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PIDD, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PIDD Antibody (B-5): sc-514981
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PIDD (h) | sc-403439 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PIDD1 code la protéine PIDD (p53-induced death domain protein), une protéine d’échafaudage de signalisation impliquée dans les réponses au stress cellulaire et la régulation de l’apoptose. PIDD participe à la formation de complexes multiprotéiques tels que le PIDDosome, reliant le stress génotoxique à l’activation de la caspase-2 et aux décisions cellulaires en aval concernant le devenir de la cellule. Au-delà de l’apoptose, PIDD a été associée à des processus liés au centrosome et à la signalisation des dommages à l’ADN, qui influencent le contrôle du cycle cellulaire et la stabilité génomique. La dérégulation de ces voies est pertinente dans les études de biologie du cancer, de phénotypes neurodéveloppementaux et d’autres affections où la signalisation du stress, l’apoptose ou la maintenance des chromosomes sont perturbées.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PIDD (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PIDD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PIDD1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PIDD1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PIDD.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PIDD1 pour l'étude de la signalisation de PIDD, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PIDD1 essentiels à la fonction de PIDD
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PIDD1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PIDD plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le PIDD plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PIDD1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PIDD plasmide HDR (h) et le PIDD (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PIDD1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PIDD1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.