Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) PIASy: sc-403125-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PIASy correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PIASy Double Nickase (h) et le plasmide PIASy Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PIAS4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PIASy Antibody (C-11): sc-166706
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PIASy | sc-403125-NIC | 20 µg | $410.00 |
PIAS4 code PIASy, une ligase E3 de SUMO qui module l’activité des facteurs de transcription et la stabilité des protéines via la SUMOylation. PIASy participe à la régulation des voies de signalisation JAK/STAT et NF-κB, aux réponses aux dommages de l’ADN et au contrôle transcriptionnel associé à la chromatine, en influençant des protéines telles que p53 et d’autres régulateurs sensibles au stress. En ajustant les réseaux de modifications post-traductionnelles, PIASy affecte la progression du cycle cellulaire, l’apoptose et les programmes de signalisation de l’immunité innée. Une activité dérégulée de PIAS4/PIASy a été associée à une signalisation inflammatoire altérée et à des états transcriptionnels oncogéniques, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la biologie du cancer et des voies liées à l’immunité.
PIASy Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PIAS4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PIAS4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PIAS4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PIAS4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.