Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PDK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-401084-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDK1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PDK1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDK1 Anticorpo (E-10): sc-515944
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-401084-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A PDK1 humana (piruvato desidrogenase quinase 1) codifica uma quinase mitocondrial que fosforila e inibe o complexo piruvato desidrogenase, restringindo a conversão de piruvato em acetil‑CoA e desviando o fluxo de carbono para longe do ciclo do TCA (ciclo do ácido cítrico). Ao modular a oxidação da glicose versus a produção de lactato, a PDK1 integra a detecção de nutrientes com a reprogramação metabólica responsiva à hipóxia e favorece a adaptação ao estresse oxidativo. Sua atividade se cruza com vias metabólicas centrais, incluindo glicólise, respiração mitocondrial e anaplerose, influenciando decisões de proliferação e sobrevivência celular. A expressão ou atividade desregulada de PDK1 tem sido associada a alterações bioenergéticas observadas em diversos contextos de doença, tornando-a um alvo relevante para estudos mecanísticos de fenótipos impulsionados pelo metabolismo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PDK1 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PDK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PDK1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PDK1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PDK1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PDK1 para a investigação da sinalização de PDK1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PDK1 críticos para a função PDK1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PDK1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PDK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PDK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PDK1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PDK1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PDK1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PDK1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PDK1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.