Plasmide Double Nickase (m) Pax-9: sc-422122-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Pax-9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Pax-9 Double Nickase (m) et le plasmide Pax-9 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Pax9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Pax-9 Antibody (7C2): sc-56823
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Pax-9 | sc-422122-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Pax-9 | sc-422122-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Pax9 code pour Pax-9, un facteur de transcription à domaine homéobox « paired box » qui régule des programmes d’expression génique contrôlant la mise en place cranio-faciale, l’odontogenèse et le développement d’organes dérivés des poches pharyngées chez la souris. Pax-9 coordonne la signalisation épithélio-mésenchymateuse et la spécification des lignages au cours de l’embryogenèse, en influençant des voies morphogéniques telles que WNT, BMP, FGF et SHH qui façonnent les tissus en développement. La perturbation ou une régulation altérée de Pax9 est associée à des anomalies du développement, notamment l’agénésie dentaire et des malformations cranio-faciales, ce qui en fait un nœud utile pour étudier le contrôle transcriptionnel de l’organogenèse. Dans des contextes adultes et de cellules souches/progénitrices, Pax-9 sert de marqueur et de régulateur des états de différenciation pertinents pour la biologie du développement et l’établissement de liens génotype–phénotype.
Pax-9 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Pax9 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Pax9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Pax9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Pax9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.