OTUD7A Plasmide Double Nickase (h): sc-414831-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OTUD7A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OTUD7A Double Nickase Plasmid (h) e il OTUD7A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira OTUD7A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OTUD7A Plasmide Double Nickase (h) | sc-414831-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OTUD7A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-414831-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OTUD7A (OTU deubiquitinase 7A) è una proteasi a cisteina umana che rimuove l’ubiquitina dai substrati proteici, modulando la segnalazione dipendente dall’ubiquitina e il turnover proteico. Attraverso la regolazione della deubiquitinazione, OTUD7A influenza vie legate alla proteostasi, al traffico endosomiale/vescicolare e alla segnalazione di risposta allo stress che contribuiscono all’omeostasi cellulare. Studi genetici e funzionali hanno associato alterazioni di OTUD7A a fenotipi di neurosviluppo, sostenendo l’indagine su come una dinamica dell’ubiquitina modificata influisca sulla differenziazione neuronale, sulla funzione sinaptica e sulla stabilità del genoma. In quanto deubiquitinasi, OTUD7A è rilevante anche per la ricerca sul rimodellamento delle catene di ubiquitina e sul cross-talk tra ubiquitinazione e altre modificazioni post-traduzionali.
OTUD7A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus OTUD7A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di OTUD7A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di OTUD7A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con OTUD7A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.