Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
OST48 Antibody (E-9) Alexa Fluor® 647: sc-74408 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of OST48 expression in HeLa (A), NCI-H1299 (B), NIH/3T3 (C), KNRK (D), Neuro-2A (E) and C3H/10T1/2 (F) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker™ MW Tag-Alexa Fluor® 488: sc-516790.
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OST48双切口酶质粒(h): sc-403323-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- OST48 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- OST48双切酶质粒（h）和OST48双切酶质粒（h2）编码针对DDOST的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：OST48: sc-74408，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
OST48双切口酶质粒(h) | sc-403323-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OST48双切口酶质粒(h2) | sc-403323-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 DDOST 基因编码 OST48，它是粗面内质网中寡糖基转移酶（OST）复合体的核心亚基之一，负责催化新生分泌蛋白和膜蛋白在翻译共进行程中的 N-连接型糖基化。通过支持糖蛋白折叠与质量控制，OST48 参与维持内质网蛋白稳态（ER proteostasis）、未折叠蛋白反应（UPR）信号传导，以及蛋白质在分泌途径中的转运。N-糖基化异常和内质网应激与肿瘤生物学、代谢功能障碍及神经退行性过程相关，因此 DDOST 是研究受体、转运体和免疫调节因子等糖链依赖性调控的重要节点。DDOST/OST48 还与 OST 亚复合体的组织方式及底物选择性有关，从而与蛋白成熟的全蛋白组范围效应相联系。
OST48 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 DDOST 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DDOST内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏DDOST的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了DDOST基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。