ORMDL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403587-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ORMDL3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ORMDL3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ORMDL3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ORMDL3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ORMDL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403587-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ORMDL3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403587-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ORMDL3 (orosomucoide-like 3) é uma proteína de membrana do retículo endoplasmático que regula a biossíntese de esfingolipídios ao modular a atividade da serina palmitoiltransferase, influenciando assim a homeostase de ceramidas e a sinalização mediada por lipídios. Por meio do seu papel no metabolismo lipídico do RE, a ORMDL3 afeta as respostas ao estresse do RE, o manejo de cálcio e vias de sinalização inflamatória que moldam os estados de ativação celular. Alterações na expressão de ORMDL3 e os desequilíbrios lipídicos associados têm sido relacionadas à desregulação imune e a fenótipos de inflamação das vias aéreas, tornando-a um alvo frequente em estudos de suscetibilidade à asma e de características inflamatórias correlatas. Em modelos de células humanas, perturbar a ORMDL3 oferece uma forma de dissecar como o fluxo de esfingolipídios se cruza com programas induzidos por citocinas, composição de membrana e vias adaptativas ao estresse.
ORMDL3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ORMDL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ORMDL3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ORMDL3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ORMDL3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.