Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Optineurin: sc-401851-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Optineurin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Optineurin Double Nickase (h) et le plasmide Optineurin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant OPTN. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Optineurin Antibody (C-2): sc-166576
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Optineurin | sc-401851-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Optineurin | sc-401851-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OPTN code l’optineurine, un adaptateur liant l’ubiquitine qui coordonne l’autophagie sélective, le trafic vésiculaire et la signalisation de l’immunité innée. L’optineurine agit comme récepteur d’autophagie lors de la xénophagie et de la mitophagie en reliant des cargos ubiquitinés aux protéines de la famille LC3, et elle module les voies antivirales dépendantes de NF‑κB et de TBK1/IRF3. Elle contribue également au maintien de l’appareil de Golgi et à la dynamique membranaire via des interactions avec la myosine VI, des GTPases Rab et des complexes de chaînes d’ubiquitine. La dérégulation ou les mutations d’OPTN ont été associées à la neurodégénérescence et à des phénotypes liés au glaucome, ce qui en fait une cible largement étudiée dans les réseaux de protéostasie et de signalisation inflammatoire.
Optineurin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus OPTN dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de OPTN. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de OPTN. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de OPTN.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.