Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
OCTN1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403258
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- OCTN1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico OCTN1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
OCTN1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403258 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SLC22A4 codifica el transportador humano de cationes orgánicos/carnitina OCTN1 (familia SLC22), una proteína de membrana multipaso que media la captación y el eflujo de zwitteriones y cationes orgánicos, incluidos sustratos relacionados con la carnitina y el antioxidante ergotionina. Al regular la disponibilidad intracelular de estos metabolitos, OCTN1 contribuye a la homeostasis redox celular, al manejo de xenobióticos y a las respuestas al estrés metabólico, con impacto funcional en tejidos epiteliales, inmunitarios y asociados a barreras. La variación genética y la expresión alterada de SLC22A4 se han vinculado con la susceptibilidad y la modulación fenotípica en trastornos inflamatorios y asociados al sistema inmunitario, lo que lo convierte en un nodo relevante para estudiar la señalización impulsada por el transporte y las interacciones con el entorno.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO OCTN1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC22A4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC22A4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC22A4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OCTN1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC22A4 para la investigación de la señalización de OCTN1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SLC22A4 críticos para la función de OCTN1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC22A4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido OCTN1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OCTN1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC22A4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OCTN1 (h) y el plásmido HDR OCTN1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC22A4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC22A4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.