Nurr1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421994-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nurr1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nurr1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Nurr1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Nr4a2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nurr1 Anticorpo (F-5): sc-376984
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nurr1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nurr1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nr4a2 codifica o Nurr1, um fator de transcrição receptor nuclear órfão essencial para o desenvolvimento, a manutenção e a resiliência ao estresse de neurônios dopaminérgicos do mesencéfalo em camundongos. O Nurr1 regula programas gênicos que controlam a síntese e o transporte de dopamina, a homeostase mitocondrial e a sinalização anti-inflamatória, integrando-se a redes transcricionais conduzidas por receptores nucleares. Ele também modula respostas microgliais e astrogliais por meio da repressão da expressão de genes pró-inflamatórios, moldando a homeostase neuroimune. A desregulação de vias dependentes de Nurr1 está implicada em neurodegeneração e disfunção sináptica, sustentando seu uso como um nó mecanístico em modelos de fenótipos parkinsonianos e neurológicos relacionados.
Nurr1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Nr4a2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Nr4a2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Nr4a2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Nr4a2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.