Plasmide Double Nickase (h) NUCKS: sc-413018-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NUCKS correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NUCKS Double Nickase (h) et le plasmide NUCKS Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NUCKS1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NUCKS | sc-413018-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NUCKS | sc-413018-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NUCKS1 code pour NUCKS, une protéine nucléaire associée à la chromatine, impliquée dans la coordination de la régulation transcriptionnelle avec la réplication et la réparation de l’ADN. Il a été rapporté que NUCKS est phosphorylée de manière dépendante du cycle cellulaire et qu’elle participe au remodelage de la chromatine ainsi qu’à des processus de maintien du génome, en interface avec la signalisation de la réponse aux dommages de l’ADN. Une expression altérée de NUCKS1 a été associée à des phénotypes prolifératifs et a été observée dans de multiples contextes cancéreux, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude du contrôle du cycle cellulaire, des réponses au stress et des réseaux régulateurs associés aux tumeurs. En tant que facteur nucléaire à large portée régulatrice, NUCKS1 est fréquemment étudiée pour sa contribution à des programmes transcriptionnels qui façonnent la croissance, la survie et la stabilité génomique.
NUCKS Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NUCKS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NUCKS1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NUCKS1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NUCKS1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.