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Plasmide Double Nickase (h) NSD2 | sc-403274-NIC | 20 µg | $410.00 |
NSD2 (également connu sous le nom de WHSC1/MMSET) code une histone lysine méthyltransférase contenant un domaine SET, qui catalyse principalement la diméthylation de H3K36, modulant l’accessibilité de la chromatine et les programmes transcriptionnels. En régulant les états épigénétiques, NSD2 influence les réponses aux dommages de l’ADN, la progression du cycle cellulaire et l’expression de gènes spécifiques de lignée, avec des liens fonctionnels avec le remodelage de la chromatine et la maturation des ARN. Une activité altérée de NSD2 est impliquée dans une reprogrammation transcriptionnelle oncogénique, notamment via une dérégulation récurrente dans les hémopathies malignes et d’autres cancers, et elle est également associée à des syndromes du développement liés à une mauvaise régulation de la chromatine. Ces propriétés font de NSD2 un nœud utile pour étudier la signalisation dépendante de la chromatine et les mécanismes de stabilité du génome.
NSD2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NSD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NSD2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NSD2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NSD2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.