Plasmide Double Nickase (h) Nrf3: sc-404543-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nrf3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nrf3 Double Nickase (h) et le plasmide Nrf3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NFE2L3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nrf3 | sc-404543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Nrf3 | sc-404543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFE2L3 code le facteur de transcription bZIP de type « cap’n’collar » Nrf3, un régulateur de l’expression de gènes sensibles à l’état rédox et des programmes de protéostasie. Nrf3 participe à la signalisation du stress oxydant et interagit avec des processus associés au réticulum endoplasmique (RE), notamment le contrôle transcriptionnel de sous-unités du protéasome qui modulent le renouvellement des protéines et l’adaptation cellulaire. Dans les cellules humaines, une activité de Nrf3 dérégulée a été associée à des modifications de la prolifération, de la différenciation et de la tolérance au stress, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la biologie tumorale et des microenvironnements inflammatoires. Les connexions de sa voie avec les réseaux de réponse antioxydante et la fonction ubiquitine–protéasome soutiennent l’exploration mécanistique de la manière dont les cellules maintiennent l’homéostasie face à des stress métaboliques et génotoxiques.
Nrf3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NFE2L3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NFE2L3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NFE2L3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NFE2L3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.