Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) NOXA: sc-400498-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NOXA correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NOXA Double Nickase (h) et le plasmide NOXA Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PMAIP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NOXA Antibody (F-3): sc-515840
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NOXA | sc-400498-NIC | 20 µg | $410.00 |
PMAIP1 code la protéine NOXA, une protéine « BH3-only » pro-apoptotique répondant à p53, qui favorise la perméabilisation de la membrane externe mitochondriale en neutralisant des membres anti-apoptotiques de la famille BCL2, avec une forte sélectivité pour MCL1 et BCL2A1. NOXA intègre les signaux de dommages à l’ADN et de stress oncogénique pour activer la voie intrinsèque de l’apoptose, influençant l’activation des caspases, la viabilité cellulaire et les décisions de destin cellulaire induites par le stress. Son expression et son renouvellement sont en outre modulés par la protéostasie médiée par l’ubiquitine et par des programmes transcriptionnels en aval de p53 et de voies de stress apparentées. La dérégulation de l’axe PMAIP1–NOXA est fréquemment étudiée dans des contextes de sensibilité altérée à l’apoptose, notamment en biologie du cancer et dans les mécanismes de résistance à l’apoptose mitochondriale.
NOXA Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PMAIP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PMAIP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PMAIP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PMAIP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.