Notch 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400424-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Notch 3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Notch 3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Notch 3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NOTCH3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Notch 3 Anticorpo (A-6): sc-515825
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Notch 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400424-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Notch 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400424-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOTCH3 codifica o Notch 3, um receptor transmembrana de passagem única que medeia sinalização justácrina por meio de proteólise induzida por ligante e translocação nuclear do domínio intracelular de Notch. No núcleo, o Notch 3 coopera com CSL/RBPJ e coativadores para regular programas transcricionais que controlam decisões de destino celular, diferenciação e homeostase tecidual. A atividade de NOTCH3 interage com vias que governam a biologia do músculo liso vascular, a integridade neurovascular e o padrão de desenvolvimento, sendo frequentemente estudada em contextos de desregulação da sinalização Notch. A sinalização alterada de NOTCH3 está associada a distúrbios vasculares e neurovasculares e tem sido investigada na proliferação de células tumorais, em estados semelhantes a células-tronco e em interações com o microambiente.
Notch 3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NOTCH3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NOTCH3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NOTCH3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NOTCH3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.