Plasmide Double Nickase (h) Neu2: sc-408479-NIC

Le gène humain **NEU2** code la neuraminidase cytosolique 2 (Neu2), une sialidase qui enlève les acides sialiques terminaux des glycoprotéines et des glycolipides, modulant ainsi la composition et le renouvellement des glycoconjugués cellulaires. En régulant le niveau de sialylation, NEU2 influence des signalisations dépendantes des glycannes, la dynamique membranaire et des processus de métabolisme des glucides qui s’entrecroisent avec des voies contrôlant la différenciation et les réponses au stress. Une activité de sialidase altérée et des profils de sialylation aberrants ont été associés à une dérégulation des interactions cellule–cellule et à des phénotypes oncogéniques, ce qui fait de NEU2 une cible utile pour étudier comment le remodelage de la glycosylation affecte une biologie pertinente pour les maladies. L’étude fonctionnelle de NEU2 soutient les recherches mécanistiques sur les réseaux de maturation des glycannes et leur rôle dans l’homéostasie cellulaire.

Neu2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NEU2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NEU2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NEU2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NEU2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.