Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO NDUFS3 (m): sc-427031
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- NDUFS3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique NDUFS3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NDUFS3 Antibody (D-4): sc-374282
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO NDUFS3 (m) | sc-427031 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Ndufs3 code pour NDUFS3, une sous-unité essentielle du complexe I de la chaîne respiratoire mitochondriale (NADH:ubiquinone oxydoréductase), codée par le noyau, qui assure le transfert d’électrons du NADH vers l’ubiquinone et contribue au pompage des protons à travers la membrane interne mitochondriale. Le bon fonctionnement de NDUFS3 est nécessaire à une phosphorylation oxydative efficace, au maintien du potentiel de membrane mitochondriale et à la régulation de l’équilibre rédox cellulaire. La perturbation des composants du complexe I peut compromettre la production d’ATP et augmenter les espèces réactives de l’oxygène, influençant le remodelage métabolique et la signalisation liée au stress. Dans des modèles murins, la perturbation de Ndufs3 est pertinente pour étudier les mécanismes de dysfonctionnement mitochondrial impliqués dans des phénotypes neuromusculaires, cardiaques et associés à la neurodégénérescence.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO NDUFS3 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ndufs3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ndufs3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ndufs3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine NDUFS3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ndufs3 pour l'étude de la signalisation de NDUFS3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ndufs3 essentiels à la fonction de NDUFS3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ndufs3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le NDUFS3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le NDUFS3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ndufs3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le NDUFS3 plasmide HDR (m) et le NDUFS3 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ndufs3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ndufs3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.