Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO NCKX5 (h): sc-405875
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- NCKX5 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique NCKX5, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NCKX5 Antibody (A-6): sc-515715
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO NCKX5 (h) | sc-405875 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SLC24A5 code pour NCKX5, un échangeur sodium/calcium dépendant du potassium qui régule l’homéostasie ionique des mélanosomes et soutient une mélanogenèse correcte dans les cellules productrices de pigment. En modulant les flux de Ca²⁺ et l’équilibre ionique au sein du système endomembranaire, NCKX5 influence la synthèse de mélanine, la maturation des mélanosomes et les voies de dépôt du pigment. Les variations génétiques de SLC24A5 sont fortement associées aux différences de pigmentation humaines dans la plage normale, et l’altération de son activité est couramment étudiée dans le contexte de la biologie des mélanocytes. En tant que transporteur membranaire impliqué dans le trafic intracellulaire et la fonction des organites, NCKX5 constitue un point d’entrée mécanistique pour étudier la manière dont le transport ionique contrôle les programmes de pigmentation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO NCKX5 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SLC24A5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SLC24A5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SLC24A5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine NCKX5.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SLC24A5 pour l'étude de la signalisation de NCKX5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SLC24A5 essentiels à la fonction de NCKX5
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SLC24A5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le NCKX5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le NCKX5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SLC24A5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le NCKX5 plasmide HDR (h) et le NCKX5 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SLC24A5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SLC24A5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.