NAPRT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406144

개요

NAPRT(니코티네이트 포스포리보실트랜스퍼레이스)는 NAD 생합성의 핵심 효소로, 니코틴산을 니코틴산 모노뉴클레오타이드로 전환하는 반응을 촉매하여 Preiss–Handler 경로를 뒷받침합니다. 세포 내 NAD 풀을 유지함으로써 NAPRT는 산화환원 항상성과 대사, 스트레스 반응, DNA 복구에 관여하는 NAD 의존성 효소들의 활성을 조절합니다. NAPRT의 발현 또는 활성 변화는 암과 염증성 질환을 포함한 다양한 질환 맥락에서 관찰되는 대사 재프로그램과 NAD 구제(salvage) 경로 의존성과 연관되어 왔습니다. 그 결과 NAPRT는 에너지 대사, 미토콘드리아 기능, 그리고 유전독성 또는 산화 스트레스에 대한 세포의 회복력을 조절하는 경로에서 자주 연구됩니다.

NAPRT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NAPRT 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NAPRT 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NAPRT의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NAPRT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NAPRT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NAPRT 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NAPRT 기능에 중요한 NAPRT 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NAPRT 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NAPRT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NAPRT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NAPRT 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NAPRT HDR 플라스미드 (h) 및 NAPRT HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NAPRT 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NAPRT 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.