Nanos3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407364

개요

NANOS3는 RNA 결합 단백질인 Nanos3를 암호화하며, Nanos3는 인간 원시 생식세포의 생존과 유지를 위해 필요한 보존된 전사 후 조절 인자입니다. Nanos3는 번역을 억제하고 선택적인 mRNA 분해(턴오버)를 촉진함으로써 생식계열 지정 프로그램에서 기능하며, 초기 발생 동안 세포 운명 결정, 증식, 세포사멸을 조절하는 경로들과 통합적으로 작용합니다. NANOS3 활성이 비정상적으로 조절될 경우 생식세포 발달 장애 및 불임과 관련된 표현형과 연관되는 것으로 알려져 있으며, 일부 생식세포 유래 종양에서 발현 변화가 보고된 바 있습니다. 생식계열 결정 인자로서 NANOS3는 RNA 조절 네트워크와 계통 제한적 전사 프로그램을 분석하는 데 유용한 핵심 표적입니다.

Nanos3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NANOS3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NANOS3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NANOS3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Nanos3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Nanos3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NANOS3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Nanos3 기능에 중요한 NANOS3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NANOS3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Nanos3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Nanos3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NANOS3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Nanos3 HDR 플라스미드 (h) 및 Nanos3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NANOS3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NANOS3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.