Plasmide Double Nickase (h) MRP-S6: sc-413064-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MRP-S6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MRP-S6 Double Nickase (h) et le plasmide MRP-S6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MRPS6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MRP-S6 Antibody (E-8): sc-390597
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MRP-S6 | sc-413064-NIC | 20 µg | $410.00 |
MRPS6 code la protéine ribosomique mitochondriale humaine S6 (MRP‑S6), un composant de la petite sous-unité 28S du mitoribosome, qui soutient la traduction des sous-unités de la phosphorylation oxydative codées par le génome mitochondrial. En permettant une synthèse efficace des protéines de la chaîne respiratoire, MRP‑S6 contribue à la protéostasie mitochondriale, au fonctionnement de la chaîne de transport d’électrons et au métabolisme énergétique cellulaire. Une perturbation des composants du ribosome mitochondrial peut compromettre l’assemblage de l’OXPHOS et favoriser des réponses de stress compensatoires liées à une modification de l’équilibre redox et à un remodelage bioénergétique. MRPS6 est donc pertinent pour l’étude des mécanismes de dysfonction mitochondriale observés dans divers phénotypes associés au métabolisme et à la neurodégénérescence.
MRP-S6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MRPS6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MRPS6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MRPS6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MRPS6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.