Plásmido Doble Nickase (h2) MPG1: sc-409072-NIC-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h2)MPG1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MPG1 (h2) y el plásmido de doble nickasa MPG1 (h22) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MPEG1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h2) MPG1 | sc-409072-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano MPEG1 codifica la proteína macrophage-expressed gene 1 (MPG1), una proteína formadora de poros implicada en la defensa inmunitaria innata y en la actividad antimicrobiana dentro de compartimentos fagolisosomales. MPG1 participa en programas efectores de células mieloides que acoplan el reconocimiento de patógenos con el tráfico vesicular, la disrupción de membranas y la señalización inflamatoria, vinculándola a procesos como la fagocitosis, la función lisosomal y los estados de activación regulados por citocinas. Se ha reportado una expresión alterada de MPEG1 en contextos de infección, inflamación crónica y biología de macrófagos asociados a tumores, lo que respalda la investigación de su papel en la polarización de células inmunitarias y la remodelación del microambiente tisular. La edición génica de MPEG1 permite estudios mecanísticos en macrófagos primarios o modelos de células inmunitarias para dilucidar las interacciones huésped–patógeno, las vías de eliminación intracelular y fenotipos de desregulación inmunitaria relevantes para la investigación en inflamación y cáncer.
MPG1 El plásmido de doble nicasa (h2) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MPEG1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MPEG1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MPEG1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MPEG1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.