Plasmide Double Nickase (m) MORF4L1: sc-423346-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MORF4L1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MORF4L1 Double Nickase (m) et le plasmide MORF4L1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Morf4l1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MORF4L1 Antibody (E-8): sc-514877
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MORF4L1 | sc-423346-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) MORF4L1 | sc-423346-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Morf4l1 code pour MORF4L1, un facteur nucléaire associé à la chromatine qui participe au contrôle transcriptionnel en modulant la dynamique d’acétylation des histones et l’organisation des nucléosomes. MORF4L1 fonctionne au sein de complexes liés à l’axe NuA4/TIP60 des histone acétyltransférases, soutenant des processus tels que la signalisation de la réponse aux dommages de l’ADN, le remodelage de la chromatine et des programmes d’expression génique couplés au cycle cellulaire. Par ces rôles, MORF4L1 est pertinent pour l’étude de la stabilité du génome, de la régulation épigénétique et des réseaux transcriptionnels sensibles au stress dans les cellules de souris. La dérégulation des voies associées à MORF4L1 est fréquemment examinée dans le contexte d’une prolifération et d’une différenciation altérées, ainsi que d’états chromatiniens oncogéniques, offrant un point d’entrée mécanistique vers une biologie pertinente pour les maladies sans impliquer de retombées cliniques.
MORF4L1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Morf4l1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Morf4l1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Morf4l1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Morf4l1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.