Particules Lentivirales d'Activation (h) MK: sc-402064-LAC

Le gène humain **MDK** code la **midkine (MK)**, un facteur de croissance sécrété se liant à l’héparine, qui module la prolifération, la survie et la migration cellulaires ainsi que la croissance des neurites au cours du développement et de la réparation tissulaire. MK interagit avec des protéoglycanes de surface et des complexes de récepteurs afin d’activer des programmes de signalisation incluant les voies **MAPK/ERK**, **PI3K–AKT** et **JAK/STAT**, influençant les réponses inflammatoires, les processus angiogéniques et le remodelage de la matrice extracellulaire. Une expression dérégulée de **MDK** a été rapportée dans de nombreux contextes pathologiques, où elle est associée à des interactions tumeur–stroma altérées, au recrutement de cellules immunitaires et à des réponses neuro-inflammatoires ou liées aux lésions. Ces propriétés font de **MDK** un nœud moléculaire utile pour étudier les transitions d’état cellulaire et la signalisation du microenvironnement en biologie du cancer, en neurobiologie et dans la recherche centrée sur l’inflammation.

Les particules d'activation lentivirales MK (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de MDK dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales MK (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription MDK, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de MK. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif MDK ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.