Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
MIS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419100
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIS O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MIS, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MIS Anticorpo (B-11): sc-166752
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419100 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Amh codifica o hormônio anti-Mülleriano (MIS), uma glicoproteína da superfamília TGF-β mais conhecida por regular a regressão dos ductos de Müller durante o desenvolvimento embrionário masculino. O MIS sinaliza principalmente por meio do AMHR2 em conjunto com receptores do tipo I para ativar programas transcricionais dependentes de SMAD1/5/8 que moldam a morfogênese do trato reprodutivo e a função gonadal. No ovário, o AMH contribui para a foliculogênese ao modular o recrutamento de folículos primordiais e a responsividade ao FSH, o que o relaciona à regulação endócrina e a fenótipos associados à fertilidade. Alterações na sinalização de AMH/MIS têm sido usadas para estudar distúrbios do desenvolvimento sexual, a biologia das células da granulosa e vias que controlam a diferenciação tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MIS (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Amh em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Amh, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Amh na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MIS.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Amh para a investigação da sinalização de MIS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Amh críticos para a função MIS
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Amh para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MIS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MIS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Amh. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MIS Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MIS (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Amh para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Amh definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.