Date published: 2025-9-8

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MIAT Plasmides CRISPR (m)

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Fiches techniques
  • Espèces cibles : mouse; pour le produit correspondant human, voir >MIAT CRISPR Plasmids (h)
  • Les plasmides CRISPR/Cas9 KO sont constitués de séquences d'ARN guide de 20 nt spécifiques de MIAT dérivées de la base de données GeCKO (v2)
  • Pour le knockout de gène, les séquences d'ARN guide dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure double brin (DSB) dans l'ADN génomique
  • Des plasmides CRISPR spécifiques pour le knockout et l'activation sont disponibles. Veuillez vous référer aux informations détailllées ici below
  • Tous les produits sont fournis en plasmides ADN purifiés et sont prêts à l'emploi, à l'exception des particules lentivirales d'activation qui sont préempaquetées en particules lentivirales pour une utilisation avec des cellules difficiles à transfecter.

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    Description

    • 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
    • Les Plasmides CRISPR/Cas9 Knockout (KO) MIAT (m) consistent en un mélange de trois plasmides chacun codant la nucléase Cas9 et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique de MIAT, élaboré pour une extinction (knockout) optimale.
    • Les séquences D'ARN guide (gARN) sont issues de la bibliothèque GeCKO (v2) et dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure du double brin (DSB) d'ADN génomique au niveau d'un site spécifique (%link_11%)
    • Pour la sélection des cellules ayant subit avec succès un DSB induit par la Cas9, il est recommandé de co-transfecter avec le Plasmide HDR MIAT (m) (sc-437345-HDR)
    • Contactez notre Service Technique pour l'anticorps de contrôle disponible

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    Description

    • 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
    • Le Plamide HDR MIAT (m) est recommandé pour la co-transfection avec le Plasmide CRISPR/Cas9 KO MIAT (m)
    • Le Plasmide HDR MIAT (m) correspond à un mélange de 2 à 3 plasmides, chacun contenant une matrice de réparation homologue dirigée de l'ADN (HDR) correspondant aux sites de coupure générés par le Plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant MIAT (m)
    • Chaque matrice HDR correspond à deux bras homologues de 800 pb élaborés pour se lier spécifiquement à l'ADN génomique englobant le site de coupure de l'ADN double brin induit par Cas9
    • Chaque Plasmide HDR intègre un gène de résistance à la puromycine afin de sélectionner les cellules dont le gène cible a été inactivé (KO) de façon stable et un gène RFP (Protéine Fluorescente Rouge) pour vérifier visuellement la transfection
    • Les gènes de résistance à la puromycine et à la RFP sont encadrés de deux sites LoxP qui permettront d'être traités ulterieurement par le Cre Vector sc-418923

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    Description

    • 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
    • Le Plasmide Double Nickase (m) MIAT correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
    • Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
    • L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
    • Les paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (m2) MIAT diffèrent des paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (m) MIAT

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    Description

    • 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
    • Le Plasmide CRISPR d'Activation (m) MIAT correspond à un système d'activation de la transcription par un médiateur d'activation synergique du système (SAM) spécifiquement conçu pour réguler positivement l'expression du gène
    • MIAT Plasmide d'Activation CRISPR (m) est composé de trois plasmides au ratio 1:1:1 : un plasmide codant pour la nucléase Cas9 désactivée (dCas9) (D10A and N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64, et un gène de résistance à la blasticidine; un plasmide codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 et un gène de résistance à l'hygromycine; un plasmide codant pour un ARN guide spécifique de 20 nt fusionné avec deux aptamères ARN MS2, et un gène de résistance à la puromycine.
    • Le complexe SAM résultant se lie à une région spécifique d'un site de départ de la transcription du gène cible et fournit un recrutement accru des facteurs de transcription pour une activation hautement efficace du gène cible

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    Description

    • 200 µl de solution stock virale correspondant à 1x 106 particules lentivirales infectieuses par ml (IFU), suffisant pour 10-20 transductions
    • Les Particules Lentivirales sont fournies prêtes à transduction pour le gene silencing
    • Les Particules Lentivirales shRNA sont généralement composées d'un mélange de 3 à 5 vecteurs d'expression individuels. Chaque vecteur code pour une séquence spécifique de shRNA d'une longueur de 19-25 nucléotides (nt) plus une épingle à cheveux (hairpin loop) élaboré pour le knockdown de l'expression du gène cible.
    • les séquences shRNA correspondent à MIAT siRNA Gene Silencer sequences
    • Après transduction, les lignées cellulaires stables exprimant le shRNA peuvent être isolées par sélection à la puromycine
    • Biosécurité - Les Particules Lentivirales sont incompétentes à la réplication, et sont conçues pour s'auto-inactiver après transduction et intégration des fractions shRNA dans l'ADN génomique des cellules cibles.
    • Les Particules Lentivirales sont destinées à un usage non commercial.

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    Informations pour la commande

    Nom du produitRef. CatalogueCOND.Prix HTQTÉFavoris

    Plasmide CRISPR/Cas9 KO MIAT (m)

    sc-437345
    20 µg
    $390.00

    Plasmid HDR MIAT (m)

    sc-437345-HDR
    20 µg
    $437.00

    Plasmide Double Nickase (m) MIAT

    sc-437345-NIC
    20 µg
    $402.00

    Plasmide Double Nickase (m2) MIAT

    sc-437345-NIC-2
    20 µg
    $402.00

    Plasmide CRISPR d'Activation (m) MIAT

    sc-437345-ACT
    20 µg
    $390.00

    Plasmide CRISPR d'Activation (m2) MIAT

    sc-437345-ACT-2
    20 µg
    $390.00

    Particules Lentivirales d'Activation (m) MIAT

    sc-437345-LAC
    200 µl
    $447.00

    Particules Lentivirales d'Activation (m2) MIAT

    sc-437345-LAC-2
    200 µl
    $447.00