Plasmide Double Nickase (m) MGAT1: sc-427040-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MGAT1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MGAT1 Double Nickase (m) et le plasmide MGAT1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mogat1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MGAT1 Antibody (H-6): sc-376079
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MGAT1 | sc-427040-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) MGAT1 | sc-427040-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Mogat1* code MGAT1 (monoacylglycérol O-acyltransférase 1), une enzyme associée au réticulum endoplasmique qui catalyse la conversion, dépendante de l’acyl-CoA, du monoacylglycérol en diacylglycérol, fournissant ainsi un substrat pour la synthèse des triacylglycérols. En régulant la disponibilité du diacylglycérol, MGAT1 relie les programmes de stockage lipidique aux processus de signalisation influencés par le DAG, en croisant des voies qui façonnent la composition lipidique des membranes et les réponses au stress métabolique. L’expression de *Mogat1* est marquée dans les tissus métaboliques et est fréquemment étudiée dans des contextes d’excès nutritionnel, d’accumulation lipidique hépatique et d’altération de la sensibilité à l’insuline, où des changements de la synthèse des lipides neutres peuvent remodeler l’homéostasie cellulaire. Ces caractéristiques font de MGAT1 une cible pertinente pour des études mécanistiques du métabolisme lipidique, de l’équilibre énergétique et des adaptations transcriptionnelles en aval dans des modèles murins.
MGAT1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mogat1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mogat1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mogat1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mogat1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.