Plásmido Doble Nickase (h) METTL6: sc-416547-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)METTL6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa METTL6 (h) y el plásmido de doble nickasa METTL6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a METTL6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: METTL6 Anticuerpo (F-8): sc-515214
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) METTL6 | sc-416547-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) METTL6 | sc-416547-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
METTL6 codifica una metiltransferasa dependiente de S-adenosil-L-metionina implicada en la modificación del ARN, con actividad descrita sobre tRNAs citosólicos específicos que pueden influir en la fidelidad de la traducción y en la producción del proteoma. Al moldear los patrones de metilación de tRNA, METTL6 se vincula a procesos celulares como el control de la traducción, la proteostasis y la adaptación al estrés, lo que puede afectar secundariamente a programas de proliferación y diferenciación. La desregulación de enzimas de modificación del ARN, incluidas las metiltransferasas de tRNA, se ha asociado con fenotipos de crecimiento alterados y con cambios en el acoplamiento entre transcriptoma y proteoma en contextos de enfermedad humana, lo que convierte a METTL6 en un objetivo relevante para estudios mecanísticos. En modelos celulares humanos, la perturbación de METTL6 permite investigar cómo las marcas epitranscriptómicas en tRNA interactúan con la regulación de la expresión génica y las transiciones de estado celular.
METTL6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus METTL6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de METTL6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de METTL6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con METTL6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.