Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) MDMX: sc-417855-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MDMX consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MDMX (h) y el plásmido de doble nickasa MDMX (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MDM4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MDMX Anticuerpo (G-10): sc-74467
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MDMX | sc-417855-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MDMX | sc-417855-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MDM4 codifica MDMX, un regulador negativo clave de la vía del supresor tumoral TP53 que modula programas de transcripción dependientes de p53 que controlan la detención del ciclo celular, la apoptosis y las respuestas al daño del ADN. MDMX se une a p53 y coopera con MDM2 para limitar la actividad de p53, influyendo así en la señalización de puntos de control y en la tolerancia celular al estrés. La alteración de la expresión de MDM4 o de la función de MDMX se ha asociado con una señalización de p53 desregulada en múltiples contextos relevantes para el cáncer y con mecanismos de vigilancia genómica deteriorados. Como resultado, MDM4 se estudia ampliamente por su papel en la reconfiguración de vías oncogénicas, las respuestas al estrés replicativo y la robustez de la red de p53.
MDMX El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MDM4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MDM4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MDM4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MDM4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.