Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MDMX: sc-417855-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MDMX correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MDMX Double Nickase (h) et le plasmide MDMX Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MDM4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MDMX Antibody (G-10): sc-74467
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MDMX | sc-417855-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MDMX | sc-417855-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MDM4 code MDMX, un régulateur négatif majeur de la voie du suppresseur de tumeur TP53, qui module des programmes transcriptionnels dépendants de p53 contrôlant l’arrêt du cycle cellulaire, l’apoptose et les réponses aux dommages de l’ADN. MDMX se lie à p53 et coopère avec MDM2 pour limiter l’activité de p53, influençant ainsi la signalisation des points de contrôle et la tolérance cellulaire au stress. Une expression altérée de MDM4 ou une fonction modifiée de MDMX a été associée à une dérégulation de la signalisation p53 dans de multiples contextes pertinents en oncologie, ainsi qu’à une altération des mécanismes de surveillance du génome. Par conséquent, MDM4 est largement étudié pour son rôle dans la reconfiguration des voies oncogéniques, les réponses au stress de réplication et la robustesse du réseau p53.
MDMX Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MDM4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MDM4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MDM4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MDM4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.