Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MDH2: sc-402825-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MDH2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MDH2 Double Nickase (h) et le plasmide MDH2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MDH2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MDH2 Antibody (1G12): sc-293474
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MDH2 | sc-402825-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MDH2 | sc-402825-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MDH2 code la malate déshydrogénase mitochondriale, une enzyme NAD‑dépendante qui catalyse la conversion réversible du malate en oxaloacétate, soutenant le cycle de l’acide tricarboxylique (TCA) et l’homéostasie rédox mitochondriale. Par son rôle dans le métabolisme oxydatif, MDH2 contribue à la production d’ATP, à l’équilibre NADH/NAD⁺ et aux flux anaplérotiques reliant la fonction mitochondriale au métabolisme global du carbone. Une perturbation de l’activité de MDH2 peut modifier la capacité respiratoire et la signalisation métabolique, des processus fréquemment étudiés dans le cadre du métabolisme tumoral, des maladies mitochondriales et de la neurodégénérescence. En tant qu’enzyme centrale de la matrice mitochondriale, MDH2 est également pertinente pour l’étude de l’adaptation métabolique à l’hypoxie, au stress nutritionnel et à la dynamique des espèces réactives de l’oxygène.
MDH2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MDH2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MDH2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MDH2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MDH2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.