MCP-5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422836

개요

마우스 Ccl12는 단핵구 유주 유도 단백질-5(MCP-5)를 암호화하며, MCP-5는 염증 반응 동안 단핵구/대식세포 및 기타 백혈구 아형의 화학주성을 촉진하는 CC 케모카인입니다. MCP-5는 주로 CCR2와 같은 케모카인 수용체를 통해 신호를 전달하여 세포골격을 재구성하고 방향성 이동을 조율하는 GPCR 매개 경로를 유도하며, 더 광범위한 사이토카인 및 선천면역 신호 네트워크와도 통합됩니다. 생체 내(in vivo) 및 시험관 내(in vitro) 연구는 Ccl12/MCP-5 활성이 조직 손상과 만성 염증에서의 백혈구 침윤 프로그램과 연관됨을 보여주며, 섬유화, 대사성 염증, 종양 연관 골수계 세포 모집과의 관련성도 제시합니다. 분비형 케모카인으로서 MCP-5는 마우스 모델에서 면역세포 간 상호작용과 기질(stroma)–면역 상호작용을 평가하기 위한 다루기 쉬운(readout이 용이한) 지표로도 활용됩니다.

MCP-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ccl12 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ccl12 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ccl12의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MCP-5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MCP-5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ccl12 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MCP-5 기능에 중요한 Ccl12 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ccl12 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MCP-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MCP-5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ccl12 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MCP-5 HDR 플라스미드 (m) 및 MCP-5 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ccl12 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ccl12 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.