Plasmide CRISPR/Cas9 KO MATH-2 (m): sc-419231
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- MATH-2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique MATH-2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MATH-2 Antibody (3G7): sc-517009
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO MATH-2 (m) | sc-419231 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Neurod6 code le facteur de transcription à hélice-boucle-hélice (bHLH) MATH-2, un régulateur clé de la différenciation, de la maturation et de la survie neuronales dans le système nerveux en développement chez la souris. MATH-2 influence des programmes géniques qui soutiennent la croissance des neurites, le guidage axonal et le maintien de l’identité neuronale glutamatergique, en coordination avec d’autres facteurs bHLH proneuronaux pour façonner les circuits corticaux et hippocampiques. Par son contrôle transcriptionnel du destin neuronal et de la connectivité, Neurod6 est pertinent pour l’étude des mécanismes du neurodéveloppement et des voies impliquées dans des phénotypes cognitifs et comportementaux. Les réseaux de différenciation pilotés par des facteurs bHLH, lorsqu’ils sont dérégulés, sont fréquemment étudiés dans des modèles de troubles du neurodéveloppement et de vulnérabilité neuronale.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO MATH-2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Neurod6 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Neurod6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Neurod6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine MATH-2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Neurod6 pour l'étude de la signalisation de MATH-2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Neurod6 essentiels à la fonction de MATH-2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Neurod6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le MATH-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le MATH-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Neurod6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le MATH-2 plasmide HDR (m) et le MATH-2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Neurod6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Neurod6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.