Plasmide CRISPR/Cas9 KO MAP-1B (h): sc-400981
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- MAP-1B Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique MAP-1B, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MAP-1B Antibody (H-8): sc-365668
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO MAP-1B (h) | sc-400981 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
MAP1B code la protéine associée aux microtubules 1B (MAP-1B), un régulateur du cytosquelette neuronal qui se lie aux microtubules et à des complexes associés à l’actine afin de soutenir l’extension des neurites, le guidage axonal et la dynamique du cône de croissance. MAP-1B contribue à la stabilisation des microtubules, au remodelage du cytosquelette et aux processus de transport intracellulaire qui façonnent la polarisation neuronale et la formation des circuits. Ses fonctions, dépendantes de la phosphorylation, s’articulent avec des voies de signalisation qui gouvernent la plasticité du cytosquelette et le développement synaptique. Une dérégulation de l’expression ou de la fonction de MAP1B a été associée à des mécanismes de maladies neurodéveloppementales et neurodégénératives, ce qui en fait une cible utile pour étudier les relations structure–fonction dans les neurones.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO MAP-1B (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MAP1B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MAP1B, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MAP1B à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine MAP-1B.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MAP1B pour l'étude de la signalisation de MAP-1B, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de MAP1B essentiels à la fonction de MAP-1B
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MAP1B pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le MAP-1B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le MAP-1B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MAP1B. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le MAP-1B plasmide HDR (h) et le MAP-1B (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MAP1B pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MAP1B définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.