Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
M-Ras Plasmides CRISPR (h)
- Espèces cibles: human
- Les plasmides CRISPR/Cas9 KO sont constitués de séquences d'ARN guide de 20 nt spécifiques de M-Ras dérivées de la base de données GeCKO (v2)
- Pour le knockout de gène, les séquences d'ARN guide dirigent la protéine Cas9 pour induire une coupure double brin (DSB) dans l'ADN génomique
- Des plasmides CRISPR spécifiques pour le knockout et l'activation sont disponibles. Veuillez vous référer aux informations détailllées ici below
- Le knockout ou l'activation d'un gène peuvent être évalués en utilisant M-Ras Antibody (C-8): sc-518225
- Tous les produits sont fournis en plasmides ADN purifiés et sont prêts à l'emploi, à l'exception des particules lentivirales d'activation qui sont préempaquetées en particules lentivirales pour une utilisation avec des cellules difficiles à transfecter.
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Les Plasmides KO CRISPR/Cas9, Plasmides Double Nickase et Plasmides d'Activation CRISPR/dCas9 sont considérés comme des "Produits sous Licence" et doivent être utilisés conformément à la Licence/Etiquette limitée. Pour en savoir plus, Cliquez ici
Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plamide HDR M-Ras (h) est recommandé pour la co-transfection avec le Plasmide CRISPR/Cas9 KO M-Ras (h)
- Le Plasmide HDR M-Ras (h) correspond à un mélange de 2 à 3 plasmides, chacun contenant une matrice de réparation homologue dirigée de l'ADN (HDR) correspondant aux sites de coupure générés par le Plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant M-Ras (h)
- Chaque matrice HDR correspond à deux bras homologues de 800 pb élaborés pour se lier spécifiquement à l'ADN génomique englobant le site de coupure de l'ADN double brin induit par Cas9
- Chaque Plasmide HDR intègre un gène de résistance à la puromycine afin de sélectionner les cellules dont le gène cible a été inactivé (KO) de façon stable et un gène RFP (Protéine Fluorescente Rouge) pour vérifier visuellement la transfection
- Les gènes de résistance à la puromycine et à la RFP sont encadrés de deux sites LoxP qui permettront d'être traités ulterieurement par le Cre Vector sc-418923
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Produits associés
Description
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) M-Ras correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Les paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h2) M-Ras diffèrent des paires d'ARNg encodées par le Plasmide Double Nickase (h) M-Ras
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: M-Ras Antibody (C-8): sc-518225
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Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmid HDR M-Ras (h) | sc-405471-HDR | 20 µg | $445.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h) M-Ras | sc-405471-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) M-Ras | sc-405471-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |