Plásmido Doble Nickase (h) LRP6: sc-400844-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LRP6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LRP6 (h) y el plásmido de doble nickasa LRP6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LRP6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LRP6 Anticuerpo (C-10): sc-25317
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LRP6 | sc-400844-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) LRP6 | sc-400844-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LRP6 (proteína 6 relacionada con el receptor de lipoproteínas de baja densidad) es un correceptor transmembrana de paso único que acopla ligandos WNT y receptores Frizzled para activar la señalización canónica WNT/β-catenina. Mediante fosforilación dependiente del ligando y el reclutamiento de AXIN, LRP6 regula la estabilización de β-catenina, los programas transcripcionales que controlan la proliferación, la diferenciación y la homeostasis tisular, y el crosstalk con vías que gobiernan la polaridad celular y el metabolismo. La actividad o expresión desregulada de LRP6 se ha vinculado con dinámicas alteradas de señalización WNT observadas en trastornos del desarrollo y en múltiples contextos patológicos, incluida la biología del cáncer y fenotipos metabólicos. Como resultado, LRP6 se estudia ampliamente por su papel en el ensamblaje del complejo receptor, el control de la señalización asociada a la endocitosis y la salida transcripcional de los genes diana de β-catenina/TCF.
LRP6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LRP6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LRP6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LRP6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LRP6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.