LDH-A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (r): sc-437361

개요

젖산탈수소효소 A(LDH-A)는 피루브산과 젖산의 상호전환을 촉매하며, 이 과정에서 NADH/NAD⁺ 순환이 동시에 일어납니다. 이는 무산소 해당과정과 산화환원 항상성을 지탱하는 핵심 반응입니다. 랫드 세포에서 LDH-A는 저산소 상태와 높은 에너지 요구 조건에서 해당과정 플럭스를 유지하는 데 기여하며, 젖산 생성, 세포질 pH 균형, 그리고 TCA 회로와의 대사적 상호작용에 영향을 줍니다. LDH-A 활성은 증식과 스트레스 적응에 동반되는 대사 재프로그래밍과 긴밀히 연결되어 있으며, HIF-1에 의해 조절되는 반응과 NAD⁺ 가용성 변화도 여기에 포함됩니다. LDH-A 의존적 젖산 대사가 비정상적으로 조절되면 허혈성 손상, 염증, 종양 유사 대사 표현형과 같은 병리적 상황과 연관되는 것으로 보고되어, 대사 신호전달의 기전 연구에서 유용한 표적이 됩니다.

LDH-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (r)는 rat 세포주에서 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LDH-A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LDH-A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LDH-A 기능에 중요한 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LDH-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (r) 및 LDH-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (r2)에 의해 암호화되는 gRNA는 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LDH-A HDR 플라스미드 (r) 및 LDH-A HDR 플라스미드 (r2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.