LAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423428

Visão geral

Tmpo codifica o polipeptídeo 2 associado à lâmina (LAP2), uma proteína da membrana nuclear interna que se liga às lâminas e à cromatina para sustentar a arquitetura do envelope nuclear e a organização do genoma em células de camundongo. As isoformas de LAP2 contribuem para a montagem do núcleo após a mitose, a regulação da ancoragem da cromatina e a coordenação da replicação do DNA e de programas transcricionais ligados à progressão do ciclo celular. Por meio de interações com a lâmina nuclear e com o fator barreira à autointegração (BAF), a LAP2 ajuda a regular a mecanotransdução, a estabilidade nuclear e o controle espacial da expressão gênica. A desregulação de componentes do envelope nuclear e de vias associadas à lâmina é amplamente relevante para modelos de laminopatias, instabilidade genômica e estados de diferenciação alterados em contextos de desenvolvimento e de doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LAP2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tmpo em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tmpo, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tmpo na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LAP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tmpo para a investigação da sinalização de LAP2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tmpo críticos para a função LAP2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tmpo para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LAP2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tmpo. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LAP2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LAP2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tmpo para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tmpo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.