Plasmide Double Nickase (h) KLK14: sc-405655-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KLK14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KLK14 Double Nickase (h) et le plasmide KLK14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KLK14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KLK14 | sc-405655-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KLK14 | sc-405655-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLK14 code la peptidase 14 apparentée aux kallikréines, une protéase à sérine de type trypsine sécrétée, qui contribue à la protéolyse extracellulaire et au remodelage du microenvironnement péricellulaire. L’activité de KLK14 peut influencer le processing des composants de la matrice, l’activation ou l’inactivation de substrats peptidiques, ainsi que la modulation de cascades de protéases qui façonnent l’homéostasie épithéliale et la biologie des barrières. Une expression ou une activité dérégulée de KLK14 a été associée à des altérations du remodelage tissulaire et de la signalisation inflammatoire, et elle est fréquemment étudiée dans le contexte de la biologie des cancers, où des changements induits par les protéases affectent des processus liés à l’invasion. En tant que gène humain, KLK14 est également pertinent pour des analyses de voies impliquant l’organisation de la matrice extracellulaire, l’équilibre protéase–antiprotéase et les interactions cellule–cellule ou cellule–matrice.
KLK14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KLK14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KLK14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KLK14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KLK14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.