Plasmide Double Nickase (h) KLF6: sc-400888-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KLF6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KLF6 Double Nickase (h) et le plasmide KLF6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KLF6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: KLF6 Antibody (E-10): sc-365633
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KLF6 | sc-400888-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KLF6 | sc-400888-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLF6 (Krüppel-like factor 6) code un facteur de transcription à doigts de zinc qui se lie à des éléments promoteurs riches en GC afin de réguler des gènes contrôlant la progression du cycle cellulaire, la différenciation et les réponses au stress cellulaire. Il participe à des programmes transcriptionnels s’articulant avec les points de contrôle dépendants de p53 et la signalisation associée au TGF-β, contribuant à un contrôle de la prolifération et de l’apoptose dépendant du contexte. Des altérations de l’activité ou de l’expression de KLF6 ont été associées à une dérégulation de la croissance et à des phénotypes liés à l’inflammation, ce qui en fait un nœud pertinent pour l’étude de la dérégulation transcriptionnelle dans la biologie des maladies humaines. En recherche biomédicale, KLF6 est couramment étudié pour ses fonctions de type suppresseur de tumeur, son rôle dans le remodelage tissulaire et la stabilité des réseaux de régulation génique.
KLF6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KLF6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KLF6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KLF6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KLF6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.