KIAA0664 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407383

Descripción general

CLUH (también conocido como KIAA0664) codifica una proteína citosólica de unión a ARN que acopla la biogénesis mitocondrial con la organización espacial de las mitocondrias al regular la estabilidad, la localización y la traducción de ARNm codificados en el núcleo para proteínas mitocondriales. Contribuye a la capacidad de fosforilación oxidativa y a la homeostasis energética celular, influyendo en procesos como las respuestas al estrés y la adaptación metabólica mediante el control de programas de expresión génica asociados a las mitocondrias. La alteración de la regulación mitocondrial vinculada a CLUH puede perturbar la función respiratoria, modificar la distribución mitocondrial e impactar en vías que gobiernan el crecimiento y la supervivencia celular. En consecuencia, CLUH es relevante para la investigación sobre la disfunción mitocondrial y los mecanismos de enfermedad asociados al metabolismo, incluidos contextos en los que la bioenergética alterada y la dinámica de los orgánulos son rasgos distintivos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KIAA0664 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CLUH en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CLUH junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CLUH tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KIAA0664.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CLUH para la investigación de la señalización de KIAA0664, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CLUH críticos para la función de KIAA0664
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CLUH para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KIAA0664 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KIAA0664 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CLUH. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KIAA0664 (h) y el plásmido HDR KIAA0664 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CLUH para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CLUH definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.