Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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KCNQ4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403090
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- KCNQ4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico KCNQ4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: KCNQ4 Anticuerpo (F-10): sc-271320
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
KCNQ4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403090 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KCNQ4 codifica una subunidad de canal de potasio dependiente de voltaje (Kv7.4) que contribuye a la corriente M y estabiliza el potencial de membrana al regular el eflujo de K⁺ en células excitables. La actividad del canal modula la descarga de potenciales de acción, la excitabilidad celular y la señalización dependiente de calcio mediante el control del potencial de reposo y de la dinámica de repolarización. KCNQ4 está estrechamente vinculado a la fisiología auditiva, donde una función alterada del canal perturba la homeostasis iónica y la excitabilidad en las células ciliadas cocleares y en los circuitos asociados. La variación genética o la desregulación de KCNQ4 se ha asociado con pérdida auditiva hereditaria, lo que lo convierte en una diana relevante para estudios mecanísticos de la transducción sensorial y de las vías de señalización neuronal.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO KCNQ4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KCNQ4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KCNQ4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KCNQ4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KCNQ4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KCNQ4 para la investigación de la señalización de KCNQ4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KCNQ4 críticos para la función de KCNQ4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KCNQ4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido KCNQ4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KCNQ4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KCNQ4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KCNQ4 (h) y el plásmido HDR KCNQ4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KCNQ4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KCNQ4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.