Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO IP-10 (m): sc-421031
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- IP-10 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique IP-10, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IP-10 Antibody (E-2): sc-374092
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IP-10 (m) | sc-421031 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cxcl10 code la chimiokine IP-10 (CXCL10), un ligand sécrété inductible par l’interféron qui se lie à CXCR3 afin d’orienter la chimiotaxie des lymphocytes T activés, des cellules NK et d’autres populations immunitaires. IP-10 est couramment induite en aval des voies IFN-γ/STAT1 et de détection des agents pathogènes, modulant le trafic leucocytaire, l’activation endothéliale et les réseaux de cytokines inflammatoires. Dans des modèles murins, Cxcl10 contribue au recrutement de cellules immunitaires au sein des tissus infectés ou lésés et influence l’équilibre entre immunité protectrice et immunopathologie. Une signalisation CXCL10 dérégulée est fréquemment utilisée comme marqueur et nœud mécanistique dans des études portant sur l’inflammation chronique, des réponses de type auto-immun et le remodelage du microenvironnement immunitaire tumoral.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IP-10 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cxcl10 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cxcl10, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cxcl10 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IP-10.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cxcl10 pour l'étude de la signalisation de IP-10, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cxcl10 essentiels à la fonction de IP-10
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cxcl10 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le IP-10 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le IP-10 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cxcl10. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le IP-10 plasmide HDR (m) et le IP-10 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cxcl10 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cxcl10 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.