Plasmide Double Nickase (h) IL-3: sc-405253-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-3 Double Nickase (h) et le plasmide IL-3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-3 Antibody (G-1): sc-28342
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-3 | sc-405253-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-3 | sc-405253-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’IL3 humain code l’interleukine‑3 (IL‑3), une cytokine hématopoïétique qui régule la survie, la prolifération et la différenciation des populations myéloïdes et des progéniteurs précoces. L’IL‑3 transmet ses signaux via le complexe récepteur de l’IL‑3 (IL3RA/CD123 associé à la chaîne β commune CSF2RB), en activant les cascades JAK/STAT, PI3K–AKT et MAPK/ERK afin de moduler l’engagement de lignée et la production de médiateurs inflammatoires. Une activité dérégulée de l’axe IL‑3–CD123 a été impliquée dans une myélopoïèse aberrante et des états d’activation des cellules immunitaires, ce qui soutient son étude en biologie des leucémies, dans les travaux sur le microenvironnement médullaire et dans des modèles d’inflammation induite par les cytokines. En tant que facteur sécrété, l’IL‑3 est également utile pour disséquer la signalisation paracrine et le trafic des récepteurs dans les systèmes de cellules hématopoïétiques et immunitaires.
IL-3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.