Particules Lentivirales d'Activation (h) IFN-β: sc-418564-LAC

Le gène humain **IFNB1** code l’interféron bêta (IFN-β), un interféron de type I qui initie la signalisation antivirale innée et façonne les réponses immunitaires adaptatives en aval. L’IFN-β se lie à **IFNAR** pour activer la phosphorylation de **STAT1/STAT2** dépendante de **JAK1/TYK2**, formant le complexe **ISGF3** avec **IRF9** afin d’induire des gènes stimulés par l’interféron, qui régulent la restriction virale, la présentation d’antigènes et l’apoptose. Sa transcription est déclenchée par des voies de récepteurs de reconnaissance de motifs (PRR) telles que **cGAS–STING**, **RIG-I/MDA5–MAVS** et **TLR3–TRIF**, qui convergent vers **IRF3/IRF7** et **NF-κB**. Une signalisation IFN-β dérégulée est impliquée dans les interféronopathies et l’inflammation auto-immune, et elle est largement étudiée dans le contexte des infections virales, de l’échappement tumoral à l’immunité et de la détection innée des acides nucléiques.

Les particules d'activation lentivirales IFN-β (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de IFNB1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales IFN-β (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription IFNB1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de IFN-β. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif IFNB1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.