Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
IFI-202 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424028
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IFI-202 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IFI-202, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IFI-202 Anticuerpo (F-7): sc-166253
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IFI-202 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424028 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino Ifi202b codifica IFI-202, un miembro inducible por interferón de la familia p200 (PYHIN) implicado en la regulación de la inmunidad innata y en el control de decisiones sobre el destino celular. IFI-202 se ha relacionado con la modulación de las respuestas al daño del ADN, la progresión del ciclo celular y la señalización apoptótica, con conexiones funcionales con redes de interferón/genes estimulados por interferón (ISG) que moldean la expresión génica inflamatoria. En células inmunitarias y en contextos estimulados por interferón, la actividad alterada de Ifi202b se asocia con una homeostasis inmunitaria desregulada y se ha estudiado en relación con fenotipos tipo autoinmunes y mecanismos de enfermedad inflamatoria en modelos murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFI-202 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifi202b en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifi202b junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifi202b tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFI-202.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifi202b para la investigación de la señalización de IFI-202, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ifi202b críticos para la función de IFI-202
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifi202b para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IFI-202 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFI-202 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifi202b. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFI-202 (m) y el plásmido HDR IFI-202 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifi202b para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifi202b definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.