Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HS6ST1 (h): sc-405111
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- HS6ST1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique HS6ST1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HS6ST1 Antibody (C-9): sc-398231
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HS6ST1 (h) | sc-405111 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
HS6ST1 code l’héparane sulfate 6‑O‑sulfotransférase 1, une enzyme résidente de l’appareil de Golgi qui catalyse la 6‑O‑sulfatation des résidus de glucosamine au cours de la maturation des protéoglycanes d’héparane sulfate. Cette modification façonne des sites de liaison de l’héparane sulfate qui contrôlent la distribution et la puissance de signalisation de multiples morphogènes et facteurs de croissance, influençant des processus tels que la signalisation des récepteurs tyrosine kinases, les interactions cellule–matrice et la structuration du développement. En ajustant la structure fine de l’héparane sulfate, HS6ST1 peut moduler, de manière dépendante du contexte, des voies incluant les signalisations FGF, WNT, BMP et Hedgehog. Des programmes de sulfatation altérés de l’héparane sulfate impliquant HS6ST1 ont été associés à une communication cellulaire dérégulée en cancérologie et à des phénotypes neurodéveloppementaux, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques de la régulation de la signalisation extracellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO HS6ST1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène HS6ST1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du HS6ST1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert HS6ST1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine HS6ST1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en HS6ST1 pour l'étude de la signalisation de HS6ST1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de HS6ST1 essentiels à la fonction de HS6ST1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de HS6ST1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le HS6ST1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le HS6ST1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus HS6ST1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le HS6ST1 plasmide HDR (h) et le HS6ST1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie HS6ST1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles HS6ST1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.